大鼠腎小管上皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

大鼠腎小管上皮分離自腎組織,；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖,、蛋白質(zhì),、氨基酸、鈉離子,、鉀離子、等,，以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長上皮性小管,，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu),、分布位置和功能分成近端小管,、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部,，曲部也稱為近曲小管,，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲,；遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管,，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞,，腎小管上皮細(xì)胞的分離,、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術(shù)，目前該分離方法有酶分離法,、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法,、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等,。腎小管上皮細(xì)胞主要功能：①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸,；②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿；③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng),；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,，這說明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深,，腎小管上皮細(xì)胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視,。因此，提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型,，在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；

　　2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；

　　7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

　　二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；

　　2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；

　　3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長,；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎小管上皮采用先機(jī)械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化,，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎小管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞傳代及凍存：

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠心肽(ANP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠A(CsA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞因子試劑盒

Humanα-enolaseELISAKit 人α烯醇化酶(α-enolase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickeninfectiouscoryza,ic試劑盒雞傳染性鼻抗體(IC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CYTOCHROMEC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MousegranzymesB,Gzms-BELISAKit小鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒規(guī)格：96T/48T

背神經(jīng)管核蛋白抗體

膜相關(guān)鳥苷酸反轉(zhuǎn)激酶1抗體

TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein

免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)

KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein

TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠腎小管上皮細(xì)胞人總膽汁酸(TBA)試劑盒

People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hNP/RA3 / ai RA33 aibody 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA3

HumangranzymesA,Gzms-AELISAKit 人顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPG試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織元素比色法定量試劑盒20次

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒規(guī)格：96T/48T