詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞
組織來(lái)源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠腎實(shí)質(zhì)分離自腎組織,;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素,、活性維生素D3、前列腺素,、激肽等,,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,,然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細(xì)胞移植可部分解決供體腎短缺的問(wèn)題,,是未來(lái)可以替代腎臟移植的有效方法,。因此,體外腎細(xì)胞的培養(yǎng)受到國(guó)內(nèi)外有關(guān)專家的密切關(guān)注,。原代腎細(xì)胞作為一種常用的腎臟毒理學(xué)研究對(duì)象,,其分離方法主要有機(jī)械研磨分離法和酶消化法,酶消化法因?qū)?xì)胞損傷小,、分離效果好而優(yōu)于機(jī)械研磨分離法,;目前常用的酶消化法主要是消化法和膠原酶消化法。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎實(shí)質(zhì)采用膠原酶-混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎實(shí)質(zhì)經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒
Human macrophage derived chemokine (MDC/CCL22) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒
PorcineSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 豬超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha1-AGP(MouseAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit小鼠α1酸性糖蛋白
血液0酸二酯酶2(PDE2)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量試劑盒10次
Mouseβ-catenin,β-catELISAKit小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)試劑盒
胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體
球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta 0.5mgRAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維受體-β抗原
KLK7重組人 KLK7 / PRSS6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALPP Protein Human 重組人 Alkaline phosphatase / ALPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FN1 Protein Human 重組人 Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta 0.5mgRAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維受體-β抗原
ALPP Protein Human 重組人 Alkaline phosphatase / ALPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FN1 Protein Human 重組人 Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
KLK7重組人 KLK7 / PRSS6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞人總抗氧化能力( T-AOC) ELISA 試劑盒
Rat adiponectin (ADP) ELISA Kit 大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒
HumanGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanheparinassociatedaibody,HIT試劑盒人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)試劑盒
組織肝脂酶活性比色法定量試劑盒20次
humanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主要穹窿蛋白(MVP)試劑盒
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作