詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠腎實質(zhì)細胞
組織來源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞簡介:
大鼠腎實質(zhì)分離自腎組織,;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素,、促紅細胞生成素,、活性維生素D3、前列腺素,、激肽等,,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,,使新陳代謝得以正常進行。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,,然而這種方法受到供體腎短缺的限制,。腎細胞移植可部分解決供體腎短缺的問題,是未來可以替代腎臟移植的有效方法,。因此,,體外腎細胞的培養(yǎng)受到國內(nèi)外有關(guān)專家的密切關(guān)注。原代腎細胞作為一種常用的腎臟毒理學(xué)研究對象,其分離方法主要有機械研磨分離法和酶消化法,,酶消化法因?qū)毎麚p傷小,、分離效果好而優(yōu)于機械研磨分離法;目前常用的酶消化法主要是消化法和膠原酶消化法,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腎實質(zhì)采用膠原酶-混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腎實質(zhì)經(jīng)檢測,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒
Human macrophage derived chemokine (MDC/CCL22) ELISA Kit 人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒
PorcineSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 豬超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha1-AGP(MouseAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit小鼠α1酸性糖蛋白
血液0酸二酯酶2(PDE2)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量試劑盒10次
Mouseβ-catenin,β-catELISAKit小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)試劑盒
胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體
球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta 0.5mgRAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維受體-β抗原
KLK7重組人 KLK7 / PRSS6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALPP Protein Human 重組人 Alkaline phosphatase / ALPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FN1 Protein Human 重組人 Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta 0.5mgRAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維受體-β抗原
ALPP Protein Human 重組人 Alkaline phosphatase / ALPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FN1 Protein Human 重組人 Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
KLK7重組人 KLK7 / PRSS6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠腎實質(zhì)細胞人總抗氧化能力( T-AOC) ELISA 試劑盒
Rat adiponectin (ADP) ELISA Kit 大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒
HumanGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 進口分裝
Humanheparinassociatedaibody,HIT試劑盒人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)試劑盒
組織肝脂酶活性比色法定量試劑盒20次
humanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主要穹窿蛋白(MVP)試劑盒
收到細胞如何處理,?
1,、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作