詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7248 |
細胞簡介:
大鼠腎皮質(zhì)上皮分離自腎組織,;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素、促紅細胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,,使新陳代謝得以正常進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腎皮質(zhì)上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腎皮質(zhì)上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物鈣調(diào)素試劑盒 植物鈣調(diào)素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 植物鈣調(diào)素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:植物鈣調(diào)素試劑盒、植物鈣調(diào)素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒 γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒,、γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶活性試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
植物D3試劑盒 植物D3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 植物D3試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:植物D3試劑盒,、植物D3 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人1,3-二0酸甘油酸試劑盒 人1,3-二0酸甘油酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人1,3-二0酸甘油酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人1,3-二0酸甘油酸試劑盒、人1,3-二0酸甘油酸試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
植物細胞分裂素(Cytokinin)試劑盒
Human ai liver kidney microsomal aibody (LKM) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體抗體(LKM)試劑盒
Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 豬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP-L2(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2)ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2
血液A含量熒光定量試劑盒20次
MouseThyroglobulin,TGELISAKit小鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒
白細胞介素19抗體
麥芽糖結(jié)合蛋白抗體
PROM1重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 標簽) Protein
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)
APP重組人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ADCYAP1R1 Protein Human 重組人 ADCYAP1R1 蛋白
CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)
ADCYAP1R1 Protein Human 重組人 ADCYAP1R1 蛋白
PROM1重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 標簽) Protein
CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白
APP重組人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠腎皮質(zhì)上皮細胞人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)試劑盒
Rat apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒
Humanai-toxoplasmaIgMaibody,ai-toxIgMELISAKit 人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)試劑盒 進口分裝
HumanHeatShockProtein90,HSP-90試劑盒人熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
組織副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴增試劑盒20次
HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。