詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7432 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積),;半球表面有很多深淺不等的溝或裂,,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂,、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,,使大腦皮質(zhì)組分為額葉,、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,,是哺乳動(dòng)物腦內(nèi)分布泛的一類細(xì)胞,,也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積最大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)(銀染色)顯示此類膠質(zhì)細(xì)胞呈星形,,從胞體發(fā)出許多長(zhǎng)而分支的突起,,伸展充填在神經(jīng)細(xì)胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經(jīng)細(xì)胞的作用,。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,,有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面,,彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細(xì)胞剛分離時(shí)呈圓形,,24h后大部分細(xì)胞貼壁,,均勻分布于瓶底,部分細(xì)胞伸出細(xì)小突起,,培養(yǎng)4-5d后細(xì)胞數(shù)量明顯增多,,呈扁平、多角形,,胞質(zhì)豐富且核漿較少,,細(xì)胞核呈橢圓形,偏于胞體一側(cè),。神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成,,不僅具有支持功能,還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質(zhì),,在維持神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境,、生存、遷移,、免疫調(diào)節(jié),、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、軸突生長(zhǎng)及功能整合等方面具有重要作用,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬白介素12(IL-12/P40)ELISAKit ELISA.
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISAKit ELISA.
豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)ELISAKit ELISA.
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA.
豬(Dex)ELISA 試劑盒
Human arginase (Arg) ELISA Kit 人精酶(Arg)試劑盒
PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha2-AP(RabbitAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit兔子α2抗纖溶酶
血液亮(leucine含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mouseβ-hexosaminidaseA,β-HexAELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A(β-HexA)試劑盒
γ-谷氨酰水解酶抗體
磷酸羧化酶2抗體
CD38重組大鼠 SCARB3 蛋白 Protein
FSH(Follicle-stimulating hormone precursor 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原
CAMK2B重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白
SPARC Protein Mouse 重組小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FSH(Follicle-stimulating hormone precursor 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白
CD38重組大鼠 SCARB3 蛋白 Protein
SPARC Protein Mouse 重組小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CAMK2B重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞兔白細(xì)胞介素-35(IL-35)試劑盒
Rat acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒
HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanglycogensyhasekinase,GSK試劑盒人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒
組織蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量試劑盒20次
Humanmonoamineoxidase,MAOELISAKit人單胺氧化酶(MAO)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。