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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X7357 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7357 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)分離自腦組織,；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,，它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,，即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3),、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回,，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂,、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質(zhì)組分為額葉,、頂葉、顳葉,、枕葉四大部分,。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種，相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞,，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是最主要的一道免疫防線(xiàn),。小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20%，小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),，斑塊及感染性物質(zhì),。無(wú)數(shù)臨床上和理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類(lèi)疾病的發(fā)病機(jī)理中起到十分重要的作用，如帕金森病,、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等,。但是過(guò)多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來(lái)源，如腫瘤壞死因子(TNF),，一氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì),。神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能：①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過(guò)程中,；②當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí)，或在大腦發(fā)育的過(guò)程中,，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理?yè)p壞時(shí),，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞；③膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類(lèi)組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽(yáng)性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原,，能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細(xì)胞制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液（12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬(HYD)ELISAKit ELISA.
豬(NO)ELISAKit ELISA.
豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA.
豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit ELISA.
豬促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞性蛋白2(MIP-2)試劑盒
Porcinegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 豬生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlphaActin(HumanAlpha-Actin)ELISAKit人α肌動(dòng)蛋白
血液0酸二酯酶4(PDE4)活性熒光定量試劑盒10次
Mouseα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)試劑盒
β晶狀體蛋白B3抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體
CD3D重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)
CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein
ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白
BTLA Protein Mouse 重組小鼠 BTLA 蛋白
MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)
ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白
CD3D重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BTLA Protein Mouse 重組小鼠 BTLA 蛋白
CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒
Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙脫氫酶(ALDH)試劑盒
Humanskieactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 人皮膚反應(yīng)因子/性因子(SRF/IF)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-II試劑盒人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
組織蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量試劑盒20次
Humanmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒
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