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大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7717 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:乙?;M蛋白H2A抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凝集素1抗體 NUP54抗體 大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠腦膜細(xì)胞 人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞;94T778 16HBE (人支氣管上皮樣細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

腦組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

雙極,、多極形

YS-01X7717

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體分離自腦皮層組織,;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,,它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標(biāo)本中,,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,,其突起也較小而少,呈珠狀,,故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞,。少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞,、前少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞,、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細(xì)胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型,。但是,,細(xì)胞發(fā)育是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程,其形態(tài),、表達(dá)產(chǎn)物和功能的演變沒(méi)有嚴(yán)格的界限,,因此,其分類是相對(duì)的,。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細(xì)胞又稱前O2Apre-O2A progenitor cell),。細(xì)胞呈圓形,表面光滑,,直徑約3μm,,體外混合培養(yǎng)時(shí)成簇生長(zhǎng)在星形膠質(zhì)表面,具有很強(qiáng)的分裂增殖潛力,,表達(dá)GM1,、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion moleculePSA-NCAM)等,。Ⅱ型少突膠質(zhì)細(xì)胞胞體常有雙極或三極突起,,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm,,有一定的分裂增殖能力,。體外培養(yǎng)時(shí)為雙潛能細(xì)胞,既可分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),,故又稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細(xì)胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,,O2A)。O2A除表達(dá)GM1和波形蛋白外還表達(dá)GD3GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),,故常用A2B5抗體標(biāo)記O2A,。Ⅲ型少突膠質(zhì)細(xì)胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細(xì)胞,。直徑約10μm,。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細(xì)胞。不成熟的OL胞體常伸出45條較粗大突起,,表面還殘留有A2B5標(biāo)記物,,同時(shí)也表達(dá)O1-O4抗原,無(wú)形成髓鞘的能力,。成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞突起有如蜘蛛網(wǎng),,大量表達(dá)半乳糖腦苷脂(galactocerebro sideGC),、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,,MBP)等,,有對(duì)軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞(簡(jiǎn)稱少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞)包括前O2AO2A和未成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞,,前兩者具有增殖能力。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化,、混合細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失培養(yǎng),、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過(guò)專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基 含B-27PDGF,、bFGF,、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次,;

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 雙極,、多極形

傳代特性 不傳代,不增殖,,存活1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%CO2,,5%

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

人著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit

人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit

人酶VB(CA5B)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit

人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit

豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ,英文名: IL4 ELISA Kit

Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒

rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素

線粒體蛋白印跡電泳內(nèi)參蛋白抗體(1000)20微克

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

ZYG11BL蛋白抗體

磷酸化原癌基因c-Raf抗體

FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原

IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞兔兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒

Human ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 人原激活肽(TAP)試劑盒

Humanmorbillivirus,MVELISAKit 人麻疹病毒(MV)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanglathione,GSH試劑盒人(GSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織單胺氧化酶B(MAO-B)活性熒光定量試劑盒20

Humanmorbillivirus,MVELISAKit人麻疹病毒(MV)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。


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