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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
三叉神經(jīng)組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7729 |
細(xì)胞簡介：
大鼠三叉神經(jīng)元分離自三叉神經(jīng)組織,；三叉神經(jīng)為最粗大的混合性腦神經(jīng)，含一般軀體感覺和特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)兩種纖維,。其特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核，纖維組成三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)根,，由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,，位于感覺根下內(nèi)側(cè)，最后進(jìn)入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中,，經(jīng)卵圓孔出顱,，隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運(yùn)動(dòng)根內(nèi)還含有三叉神經(jīng)中腦核有關(guān)的纖維,，主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺,。三叉神經(jīng)內(nèi)以軀體感覺神經(jīng)纖維為主，這些纖維的細(xì)胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)（半月節(jié)）內(nèi),，該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處,，為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成,，其中樞突集中構(gòu)成了粗大的三叉神經(jīng)感覺根,，由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦，止于三叉神經(jīng)諸感覺核,，其中傳導(dǎo)痛溫覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核,；傳導(dǎo)觸覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的周圍突組成三叉神經(jīng)三大分支,，即第1支眼神經(jīng),、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng),。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi),、口腔,、鼻腔、鼻旁竇的粘膜,、牙,、腦膜等，傳導(dǎo)痛,、溫、觸等多種感覺,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠三叉神經(jīng)元采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠三叉神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
中文名稱 方法 規(guī)格
兔子端粒酶(TE)ELISAKit ELISA.
兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISAKit ELISA.
兔子促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISAKit ELISA.
豬表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒
Human ai BB aibody (BB-Ab) ELISA Kit 人抗BB抗體(BB-Ab)試劑盒
Porcinelowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit 豬低分子肝素(LMWH)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALDHELISAKit大鼠乙脫氫酶
血液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒50次
MouseVitaminB6,VB6ELISAKit小鼠B6(VB6)試劑盒
WDR68蛋白抗體
磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體
CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)
CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)
ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA 試劑盒
Rat amylin (Amylin) ELISA Kit 大鼠胰淀素(Amylin)試劑盒
HumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanGlathioneperoxidase,GSH-Px試劑盒人過氧化酶(GSH-Px)試劑盒
組織單胺氧化酶A型(MAO-A)活性熒光定量試劑盒20次
HumanMotilin,MTLELISAKit人血管活性腸肽(VIP)試劑盒
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