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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
前列腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7464 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠前列腺平滑肌分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官,；前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子,，底朝上，與膀胱相貼,，尖朝下,，抵泌尿生殖膈,，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò),，扼守著尿道上口，所以,，前列腺有問(wèn)題時(shí),，排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的,，具有內(nèi),、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,，前列腺每天分泌前列腺液,，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺,，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素",。前列腺平滑肌細(xì)胞是前列腺的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,。前列腺平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
人H-rasELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒 ,，英文名： SCF/MGF ELISA Kit
Human para aminobenzoic acid (PABA) ELISA Kit 人對(duì)(PABA)試劑盒
RabbitCollagenaseIELISAKit 兔子膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforb-FABP(Humanbrainfattyacidbindingprotein)ELISAKit人腦型脂肪酸結(jié)合蛋白
細(xì)菌糖酵解MRVP試劑盒20次
RabbitIerferonα,IFN-αELISAKit兔子α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T
SBDS蛋白抗體
磷酸化芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體
DPP4重組食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 Protein
IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mgIL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 Protein
IL23R Protein Human 重組人 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
S100A5 Protein Mouse 重組小鼠 S100A5 蛋白
IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mgIL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原
IL23R Protein Human 重組人 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DPP4重組食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 Protein
S100A5 Protein Mouse 重組小鼠 S100A5 蛋白
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 Protein
大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)試劑盒
Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanEsadiolreceptor,ER試劑盒人雌二醇受體(ER)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織SGK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit人骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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