詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
氣管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7014 |
細(xì)胞簡介:
大鼠氣管上皮分離自氣管組織;氣管(Trachea),,呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣,,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四,、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左,、右主支氣管,,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),,缺口向后,,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài),。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,,不僅是各種病原體,、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成,、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng),。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性,因此,,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抗鼠抗體(HAMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抗鼠抗體(HAMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒 ,,英文名: HGF ELISA Kit
Human cyclophosphamide (CTX) ELISA Kit 人對環(huán)0酰胺(CTX)試劑盒
RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit 兔子膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBF(MousefactorB)ELISAKit小鼠B因子
細(xì)菌糖酵解酚紅試劑盒20次
rabbitiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒規(guī)格:96T/48T
RH血型C糖蛋白抗體
磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體
CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein
GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)
SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein
IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白
GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)
IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein
IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白
SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein
大鼠氣管上皮細(xì)胞兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor B (VEGF-B) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒
Humanueinsulin,TIELISAKit 人真胰島素(TI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanErythropoietieceptor,EPOR試劑盒人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織RSK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanosteonectin,,ONELISAKit人骨粘連蛋白(ON)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。