大鼠胚胎干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：Beta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白A鏈抗體 惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體 NPIP樣蛋白1抗體 大鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞 小鼠前列腺成纖維細(xì)胞 人尤文氏肉瘤細(xì)胞;TC-32 VE (人血管內(nèi)皮細(xì)胞)

大鼠胚胎干細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠胚胎干分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細(xì)胞（Embryonic stem cell,，ESCs,，簡(jiǎn)稱ES、EK或ESC細(xì)胞）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞，它具有體外培養(yǎng)無(wú)限增殖,、自我更新和多向分化的特性,。無(wú)論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型,。進(jìn)一步說(shuō),，胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性,，能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官,，包括生殖細(xì)胞。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),，細(xì)胞核大,，有一個(gè)或幾個(gè)核仁，胞核中多為常染色質(zhì),，胞質(zhì)胞漿少,，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。體外培養(yǎng)時(shí),，細(xì)胞排列緊密,，呈集落狀生長(zhǎng)。用堿性磷酸酶染色,，ES細(xì)胞呈棕紅色,，而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限,，形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清,，細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣,，多數(shù)呈島狀或巢狀,。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 微米～18 微米，豬,、牛,、羊ES細(xì)胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米,。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別,，有其特定的生長(zhǎng)特性和特定的標(biāo)志，例如堿性磷酸酶活性非常高,，帶有胚胎階段特異性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA）,，人類胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標(biāo)志,，這些特性和標(biāo)志均可以用于對(duì)胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,，除此之外,，胚胎干細(xì)胞還可以在體外傳代，并保持正常核型,。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層（MEF）上培養(yǎng)時(shí),，胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖，長(zhǎng)期保持核型正常和穩(wěn)定,，凍存解凍也不影響不分化的特性,。另外，胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性,，目前證明端粒酶與細(xì)胞衰老密切相關(guān),，多數(shù)成熟細(xì)胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點(diǎn),，也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長(zhǎng)的原因,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎干采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶,、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng),，消化傳代純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎干經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含LIF,、BMP,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次,；

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 短梭形、多角形

傳代特性 可傳5-8代左右

消化液 0.025%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞傳代及凍存：

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱：   Fibronectin   規(guī)格：      英文縮寫：   FN

FMS樣酪酸激酶   英文名稱：   Fms-related tyrosine kinase-3   規(guī)格：      英文縮寫：   Flt3

小鼠Flt3配體   英文名稱：   Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   Flt3 Ligand

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱：    fibronecti   規(guī)格：      英文縮寫：   FN

小鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)試劑盒 96T/48T

Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)試劑盒

Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenIerleukin1,IL-1試劑盒雞白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

PE標(biāo)記人CD18單克隆抗體

酪激酶A/B/C重組兔單克隆抗體

PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein

PRLR Protein Rat 重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

CCL1重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein

大鼠胚胎干細(xì)胞兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒

People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)試劑盒E

Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humandynorphin,Dyn試劑盒人強(qiáng)啡肽(Dyn)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織P38a激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

　　二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。