詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
膀胱組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7229 |
細胞簡介:
大鼠膀胱上皮分離自膀胱組織,;膀胱是一個儲尿器官,,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,,位于骨盆內(nèi),,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,,可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,,逼尿肌收縮,,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內(nèi)口,,防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌,、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織),。其主要作用有:①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子,;③受損后影響系膜細胞和上皮細胞,,進而影響腎臟病變。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠膀胱移行上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠膀胱移行上皮經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱 方法 規(guī)格
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit ELISA.
人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit ELISA.
人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit ELISA.
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒
Human ai Ku aibody (ai-Ku-Ab) ELISA Kit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒
PorcineCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit 豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlb白蛋白(夾心法一步法)
血液型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量試劑盒20次
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒
Pacific Blue標記小鼠NK1.1單克隆抗體
跨膜蛋白109抗體
IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉運調(diào)節(jié)因子抗原
CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標簽) Protein
AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標簽)
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標簽)
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉運調(diào)節(jié)因子抗原
AKR1A1 Protein Human 重組人 AKR1A1 蛋白 (His 標簽)
IL13RA1重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 標簽)
CAT重組人 CAT / Catalase 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠膀胱移行上皮細胞兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒
Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒
Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 進口分裝
HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA試劑盒人細胞毒素相關蛋白A(CagA)試劑盒
組織IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivatorinhibitor,,PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。