詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7351 |
細胞簡介:
大鼠腦微血管內皮分離自腦組織,;腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,,能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦,,大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質對維持血管張力,、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,,在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。與外周內皮細胞相同,,大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子,調控白細胞進入大腦,。由于微血管內皮細胞的器官特異性,內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織,。其主要特征如下:①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內皮阻抗,,延遲細胞旁的通量,;②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構,其液相物質胞飲水平較低,;③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統(tǒng),,從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法,、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腦微血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人脂0壁酸試劑盒 人脂0壁酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂0壁酸試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人脂0壁酸試劑盒,、人脂0壁酸試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
人脂聯(lián)素試劑盒 人脂聯(lián)素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂聯(lián)素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人脂聯(lián)素試劑盒、人脂聯(lián)素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒 人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒,、人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人脂肪酸結合蛋白試劑盒 人脂肪酸結合蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂肪酸結合蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人脂肪酸結合蛋白試劑盒,、人脂肪酸結合蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 ,,英文名: iFABP ELISA Kit
Human multidrug resistance associated protein (MRP) ELISA Kit 人多藥耐藥相關蛋白(MRP)試劑盒
rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBetaGD(HumanBeta-glucuronidase)ELISAKit人β葡萄糖酸苷酶
細菌腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit兔子肝細胞生長因子(HGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
NAALADL2蛋白抗體
精神分裂癥與犰狳重復基因抗體
SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein
Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)
MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白
GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白
Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)
IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白
SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein
GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白
MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠腦微血管內皮細胞豚鼠白介素1β(IL1B)試劑盒 ,英文名: IL1B ELISA Kit
Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素結合酶(E2/UBCE)試劑盒
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 兔子白介素6(IL-6)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-CG(HumanChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit人絨毛膜β
細菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量試劑盒20次
rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。