詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
毛囊組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7326 |
細(xì)胞簡介:
大鼠毛囊分離自皮膚毛囊組織,;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,,中心是一根毛發(fā),,立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔,。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,,毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來。毛囊開口起始于皮膚表面,,而每個(gè)毛囊又和一個(gè)或多個(gè)腺胞相連,。每個(gè)腺胞解離成富含脂質(zhì)的物質(zhì),卻又通過一個(gè)共同和毛囊相通連的皮脂腺導(dǎo)管將分泌物運(yùn)送到皮膚表面排出,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠毛囊采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠毛囊經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱 方法 規(guī)格
大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISAKit ELISA.
大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISAKit ELISA.
大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISAKit ELISA.
豬白介素17(IL-17)ELISA 試劑盒
Human ai Sc1-70 aibody (Sc1-70-Ab) ELISA Kit 人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)試劑盒
Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 豬白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAIF(Mouseapoptosisinducingfactor)ELISAKit小鼠凋亡誘導(dǎo)因子
血液/活化II(THROMBIN/FACTORIIa)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒
Kelch樣蛋白10抗體
甲型流感病毒(H2N2)血凝素抗體
THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)
ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)
AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠毛囊細(xì)胞豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒
Rat angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒
Humanai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKIT 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanCyclin-dependekinase1,CDK-1試劑盒人周期素依賴性激酶1(CDK-1)試劑盒
組織GRK4α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPrednisolone,PSELISAKit人龍(PS)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。