化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源：脈絡(luò)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡介：
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮分離自眼球脈絡(luò)膜組織,；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細(xì)胞,，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,，當(dāng)眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時(shí)，堅(jiān)硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色,，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,，由纖維組織,、小血管和毛細(xì)血管組成,，軟而薄，棕紅色,，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,，其含有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用,，使反射的物象清楚,。同時(shí)對視覺系統(tǒng)起保護(hù)作用，對整個(gè)視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用,。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細(xì)胞，有營養(yǎng)和遮光作用,。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人載脂蛋白B1(apo-B1)試劑盒 96T/48T
人載脂蛋白A4（apo-A4）試劑盒 96T/48T
人載脂蛋白A2(apo-A2)試劑盒 96T/48T
人載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 96T/48T
豚鼠白介素13(IL-13)試劑盒 ,，英文名： IL-13 ELISA Kit
Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)試劑盒
rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M
細(xì)菌異化型鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次
rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
INO80C蛋白抗體
脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
FAS重組食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 Protein
IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I 0.5mgIGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)
MUSK重組人 MUSK Kinase 蛋白 (aa 433-783, His & GST 標(biāo)簽) Protein
IVD Protein Human 重組人 Isovaleryl-CoA dehydrogenase / IVD 蛋白 (aa 30-423, His 標(biāo)簽)
PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I 0.5mgIGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)
IVD Protein Human 重組人 Isovaleryl-CoA dehydrogenase / IVD 蛋白 (aa 30-423, His 標(biāo)簽)
FAS重組食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 Protein
PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MUSK重組人 MUSK Kinase 蛋白 (aa 433-783, His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞豚鼠鉤端IgG(Leptospira)試劑盒 ，英文名： Leptospira ELISA Kit
Human toxic shock syndrome toxin 1 iegrated (TSST-1) ELISA Kit 人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)試劑盒
RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGFELISAKit大鼠堿性成纖維生長因子
細(xì)菌色肉湯500毫升
RabbitIerleukin1,IL-1ELISAKit兔子白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
化工儀器網(wǎng)