詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
淋巴管 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7099 |
細胞簡介:
大鼠淋巴管內(nèi)皮分離自淋巴管組織,;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成,。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,但管徑較細,,管壁較薄,,瓣膜較多且發(fā)達,外形呈串珠狀,。淋巴管根據(jù)其位置分為淺,、深二種,。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,,收集皮膚和皮下組織的淋巴,。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴,。淺,、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,,通常經(jīng)過一個或多個淋巴結(jié),,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,,產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞,,參與機體的免疫反應。當局部感染時,,細菌,、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大,。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),,參與維持體液平衡,調(diào)節(jié)淋巴細胞再循環(huán)和機體的免疫反應和組織液及蛋白質(zhì)的運輸,,在疾病過程中也起著重要作用,。近年研究表明,LEC還在傷口愈合,、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關。淋巴管內(nèi)皮細胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液,、蛋白和組織壓力平衡,;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤,;②淋巴管炎,;③淋巴結(jié)核。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠淋巴管內(nèi)皮采用消化法結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠淋巴管內(nèi)皮經(jīng)VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人組織因子(TF)試劑盒 96T/48T
人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)試劑盒 96T/48T
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 96T/48T
人組織相容性復合體Ⅰ類相關基因D(MICD)試劑盒 96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 ,,英文名: TIMP-1 ELISA Kit
Human factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 人凋亡相關因子配體(FASL)試劑盒
MonkeyInsulin,INSELISAKit 猴胰島素(INS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforbFGF-9ELISAKit大鼠堿性成纖維細胞生長因子9
細菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次
rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit兔子白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
G蛋白偶聯(lián)受體108抗體
肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體
TXN重組小鼠 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)
CGREF1重組人 CGREF1 蛋白 Protein
IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白
NTRK2 Protein Canine 重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白
基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)
IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白
TXN重組小鼠 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
NTRK2 Protein Canine 重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白
CGREF1重組人 CGREF1 蛋白 Protein
大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA 試劑盒
Human vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 人K1(VK1)試劑盒
HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 人(EPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanComplemefragme3a,C3a試劑盒人補體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CaMKII激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanP-Selectin/CD62P/GMP140ELISAKit人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。