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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
軟骨組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7737 |
細(xì)胞簡介：
大鼠髖臼軟骨分離自髖關(guān)節(jié)軟骨組織，髖關(guān)節(jié)是人體最大,、的關(guān)節(jié)之一，是典型的球臼關(guān)節(jié),。髖關(guān)節(jié)既具有良好的內(nèi)在穩(wěn)定性,，也具有靈活的活動性。髖臼位于髖骨外側(cè)面中央,，呈半球形深凹,，直徑約30~50mm，表面覆蓋厚約2mm的透明關(guān)節(jié)軟骨,，呈半月形分布,。中央是髖臼窩，無軟骨覆蓋,，由哈佛腺充填,，可以隨關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的增減擠出或者吸入關(guān)節(jié)液，以維持關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的平衡。髖臼邊緣的環(huán)形關(guān)節(jié)盂唇可以加深,、加寬髖臼,，使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩(wěn)定的位置，加強(qiáng)了髖關(guān)節(jié)的穩(wěn)定性,。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,，單個分布、體積較小,、呈橢圓形,，長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,，細(xì)胞核圓形或卵圓形,、染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,，常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成,，稱為同源細(xì)胞群,。電鏡下，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體,。在組織切片中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長,；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠髖臼軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠髖臼軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,；
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
蛋白酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
堿性蛋白酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒
People gathered protein (Agrin) ELISA Kit 人聚集蛋白(Agrin)試劑盒
Porcinesodium-glucosecoanspoer1,SGLT1ELISAKit 豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALP(Humanalkalinephosphatase)ELISAKit人堿性0酸酶
血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒
G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體
活化復(fù)制因子2抗體
CLEC14A重組小鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原 0.5mgCD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原
PHOSPHO1重組人 PHOSPHO1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALDH3A1 Protein Human 重組人 ALDH3A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原 0.5mgCD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原
ALDH3A1 Protein Human 重組人 ALDH3A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CLEC14A重組小鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PHOSPHO1重組人 PHOSPHO1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠髖臼軟骨細(xì)胞小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒
Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒
Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 進(jìn)口分裝
Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒
真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
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