大鼠結(jié)腸平滑肌細胞公司正在出售的產(chǎn)品：過氧化物酶HAO2抗體 核酸內(nèi)切酶G樣蛋白1抗體 NK細胞受體2A抗體 大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞 小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細胞 人肺癌細胞;calu-1-luc-EGFP MCF 10A (人正常乳腺上皮細胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠結(jié)腸平滑肌細胞

組織來源：結(jié)腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細胞簡介：

大鼠結(jié)腸平滑肌分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸,。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",，將小腸包圍在內(nèi),。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層,、黏膜肌層）,，黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜）,。結(jié)腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形,、外縱行平滑肌；結(jié)腸運動少而緩慢,，對刺激的反應(yīng)也較遲緩,。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質(zhì)分泌,、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用,。結(jié)腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。結(jié)腸平滑肌運動活性受到神經(jīng)遞質(zhì)、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié),。隨著現(xiàn)代胃腸動力學(xué)研究的進展,，對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發(fā)展到細胞,、分子水平,，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標(biāo)本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學(xué)等實驗,。體外培養(yǎng)細胞,，由于影響因素單一，是研究細胞功能以及相應(yīng)的細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的基礎(chǔ),。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠結(jié)腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠結(jié)腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

脂肪酸合成酶（FAS）測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

蔗糖0酸化酶(SP)測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

硫氧還蛋白氧化還原酶（xR）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

還原酶（GR）測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

植物滲調(diào)蛋白(Osmotins)試劑盒

Human ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

PorcineInsulin,INSELISAKit 豬胰島素(INS)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforaFGF-1ELISAKit大鼠酸性成纖維細胞生長因子1

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量試劑盒20次

Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

FITC標(biāo)記小鼠CD45RB單克隆抗體

黑色素瘤抑制活性蛋白3抗體

KLRC1重組小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

踝蛋白(TLN)重組蛋白 Recombinant Talin (TLN)

CBR3重組人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)

踝蛋白(TLN)重組蛋白 Recombinant Talin (TLN)

ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

KLRC1重組小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)

CBR3重組人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠結(jié)腸平滑肌細胞小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒

Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)試劑盒 進口分裝

HumanCiliaryNeuroophicFactor,CF試劑盒人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒

組(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

humanS100calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S100A8ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)試劑盒

收到細胞如何處理,？

1,、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作