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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：結(jié)腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠結(jié)腸黏膜上皮分離自結(jié)腸組織,；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸,。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,，大部分固定于腹后壁,，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi),。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層,、固有層、黏膜肌層）,，黏膜下層（疏松結(jié)締組織）,，肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,，持續(xù)暴露于大量抗原中,，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線。因此,，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收,、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強(qiáng)度,。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法,，為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白 英文名稱： fatty acid-binding protein 規(guī)格： 英文縮寫： FABP4
凋亡相關(guān)因子Fas/Apo-1 英文名稱： apoptosis-inducing factor Fas/Apo-1 規(guī)格： 英文縮寫： Fas/Apo-1
凋亡相關(guān)因子配體 英文名稱： apoptosis-inducing factor ligand 規(guī)格： 英文縮寫： Fas-L
凋亡相關(guān)因子配體 英文名稱： apoptosis-inducing factor ligand 規(guī)格： 英文縮寫： Fas-L
植物A(VA)ELISA 試劑盒
Human ai nuclear aibody (ANA) ELISA Kit 人抗核抗體(ANA)試劑盒
Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 豬血小板活化因子(PAF)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforaFGF-1(Humanacidicfibroblastgrowthfactor1)ELISAKit人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1
血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)定量試劑盒20次
MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒
FITC標(biāo)記人CD64單克隆抗體
黑色素聚集激素/黑色素富集激素MCH抗體
PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
D受體(VDR)重組蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)
NRG3重組人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白 Protein
ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
D受體(VDR)重組蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)
ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NRG3重組人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白 Protein
大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒
Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒
組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒
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