詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脊髓組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7714 |
細胞簡介:
大鼠脊髓星形膠質(zhì)分離自脊髓組織,;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護,;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息,。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,,在椎管里面,上端連接延髓,,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),,分布到四肢、體壁和內(nèi)臟,。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),,主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),,主要由有髓神經(jīng)纖維組成,;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚,、肌肉和內(nèi)臟器官,。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞,。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié),,31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,,即神經(jīng)細胞,,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突,、軸突,。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲,、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、游離核糖體和一個有明顯核仁的核,。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體,。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠脊髓星形膠質(zhì)采用消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠脊髓星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人組織蛋白酶D(cath-D)試劑盒 96T/48T
人組織蛋白酶B(cath-B)試劑盒 96T/48T
人組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒 96T/48T
人組胺(HIS)試劑盒 96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)試劑盒 ,,英文名: MMP8 ELISA Kit
Human calcineurin (CaN) ELISA Kit 人鈣調(diào)0酸酶(CaN)試劑盒
rabbitEndothelin1,ET-1ELISAKit 兔子內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBACE2(Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2)ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2
線蟲二環(huán)氧丁烷(diepoxybane)誘導突變試劑盒10次
Rabbitcardiacisoformofopni,cELISAKit兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒規(guī)格:96T/48T
EYA4蛋白抗體
含半胱和組豐富域蛋白1抗體
BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)
CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein
IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白
催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)
IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein
NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
大鼠脊髓星形膠質(zhì)細胞小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒
Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)試劑盒
Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancholesterol,CH試劑盒人(CH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫外線處理DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。