詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠肌源性干細(xì)胞
組織來源:肌肉組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠肌源性干分離自肌肉組織,;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激,,MDSCs可以分化為脂肪,、骨骼、軟骨,、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型,;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,已成為治療心肌梗死,、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點,;近年來,肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視,。需注意的是,,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞,;平時處于靜止?fàn)顟B(tài),,在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時才會激活;并且隨著年齡的增加,,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行。肌源性干細(xì)胞的體外擴增對細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要,。對肌源性干細(xì)胞的擴增研究發(fā)現(xiàn),,EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進入有絲分裂周期,,從而刺激細(xì)胞增生,。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化,,從而保持干細(xì)胞表型,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肌源性干采用膠原酶--聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,,最后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
人組胺試劑盒 人組胺試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人組胺試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人組胺試劑盒,、人組胺試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒、人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人總前列腺特異抗原試劑盒 人總前列腺特異抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人總前列腺特異抗原試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人總前列腺特異抗原試劑盒,、人總前列腺特異抗原試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人總膽汁酸試劑盒 人總膽汁酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人總膽汁酸試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人總膽汁酸試劑盒、人總膽汁酸試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豚鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒 ,,英文名: cAMP ELISA Kit
Human azidothymidine (AZT) ELISA Kit 人(AZT)試劑盒
MonkeyapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 猴載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforbFGF-4(Humanbasicfibroblastgrowthfactor4)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4
細(xì)菌乳糖酵解溴百里酚藍(BTB)瓊脂平板50個
RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit兔子白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶3-β1抗體
谷受體相互作用蛋白2抗體
CDH17重組大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein
GLUT2(Glucose transporter type 2 0.5mgGLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(抗原)
TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白
LGALS1 Protein Mouse 重組小鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
GLUT2(Glucose transporter type 2 0.5mgGLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(抗原)
IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白
CDH17重組大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein
LGALS1 Protein Mouse 重組小鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
大鼠肌源性干細(xì)胞小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒
Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)試劑盒
Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanchemerin試劑盒人chemerin試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米NK603品系試劑盒20次
Humanserineprotease,PRSSELISAKit人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒規(guī)格:96T/48T