詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠肌腱成纖維細(xì)胞
組織來源:肌腱組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠肌腱成纖維分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,,便于肌肉附著和固定,。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動,。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,,有收縮能力,,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,,沒有收縮能力,。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,,闊肌的肌腱闊而薄,,呈膜狀,又叫腱膜,。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量,、爆發(fā)力和耐力,。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,;成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肌腱成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肌腱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
人足盂蛋白(PCX)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PCX (Podocalyxin) ELISA Kit
人組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TPA (Tissue Polypeptide Aigen) ELISA Kit
人組織多肽特異性抗原(TPS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TPS (Tissue Polypeptide Specific Aigen) ELISA Kit
人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit
豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 ,英文名: TNF-α ELISA Kit
Human protein kinase C (PKC) ELISA Kit 人蛋白激酶C(PKC)試劑盒
Monkeyα1-microglobulin,α1-MGELISAKitα1微球蛋白(α1-MG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBMP-6ELISAKit大鼠骨形成蛋白6
細(xì)菌鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DIRAS2蛋白抗體
高遷移率族蛋白2抗體
CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽) Protein
ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)
ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein
IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白
EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
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CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽) Protein
EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein
大鼠肌腱成纖維細(xì)胞小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒
Human vitamin A (VA) ELISA Kit 人A(VA)試劑盒
HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancecropinB,CecB試劑盒人殺菌肽B(CecB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米GA21品系試劑盒20次
HumanSerumamyloidP,,SAPELISAKit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T