詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
海綿體組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7422 |
細胞簡介:
大鼠海綿體內(nèi)皮分離自海綿體組織,;陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構(gòu)成的血竇結(jié)構(gòu),它主要包括海綿體內(nèi)皮細胞,、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分,。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質(zhì)的膠原中,而海綿體內(nèi)皮細胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,,僅占海綿體組織的2.8%,。在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細胞與基膜的聯(lián)系,,破壞海綿體內(nèi)皮細胞間的緊密連接,。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大,平滑肌細胞和成纖維細胞也將被消化下來,,從而影響海綿體內(nèi)皮細胞的純度,。因此,比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內(nèi)皮細胞的關(guān)鍵,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠海綿體內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合機械分離法,、并用內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠海綿體內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒、小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠橫紋肌輔肌動蛋白試劑盒、小鼠橫紋肌輔肌動蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒,、豚鼠主要組織相容性復(fù)合體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat erythropoietin (EPO) ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素(EPO)試劑盒
Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickeumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒雞壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞TNFBETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEsadiol,E2ELISAKit小鼠雌二醇(E2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ATP-依賴的RNA解旋酶30抗體
富含半胱酸性分泌/骨粘連蛋白多糖抗體
CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原
VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein
CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白
DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白
FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原
CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白
CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白
VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein
大鼠海綿體內(nèi)皮細胞小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒
Neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒
HumancyclophilinB,CyPBELISAKit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-macrophageaibody試劑盒人抗巨噬細胞抗體(ai-macrophageAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物培養(yǎng)細胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。