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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦海馬體 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7348 |
細(xì)胞簡介：
大鼠海馬神經(jīng)元分離自海馬體,；海馬體(Hippocampus),，又名海馬回,、海馬區(qū)、大腦海馬,，海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí),。海馬神經(jīng)元細(xì)胞是海馬區(qū)的主要細(xì)胞組成，主要功能是參與近期記憶,、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié),、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一,。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),，在學(xué)習(xí)、記憶,、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細(xì)胞聚集區(qū)，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對獨(dú)立分布的特點(diǎn),，境界相對清晰,，便于取材，因此,，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究者當(dāng)做理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細(xì)胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用(細(xì)胞因子)的有效細(xì)胞模型，其在神經(jīng)生物學(xué),，發(fā)育生物學(xué)體外實(shí)驗(yàn)研究中已被廣泛應(yīng)用,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海馬神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海馬神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠載脂蛋白E(mouse APO E) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠B淋巴細(xì)胞刺激因子(mouse BAFF) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠心肽(ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Gao Min rat thyroxine (u-T4) ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒
HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 人透明質(zhì)酸酶(HAase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AG試劑盒雞白血病病毒抗原(ALV-AG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞BAX蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
A-Raf抗體
輔肌動蛋白相關(guān)LIM蛋白抗體
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原)
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
NT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原)
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒
HumangranulysinELISAKit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-doublesandedDNA,dsDNA試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感(DTNB)比色法定量試劑盒20次
HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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