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產品名稱：大鼠冠狀動脈平滑肌細胞

組織來源：冠狀動脈

產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

大鼠冠狀動脈平滑肌分離自冠狀動脈組織,；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,，起于主動脈根部，分左右兩支,，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型,、均衡型,、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支,。左冠狀動脈為一短干,，發(fā)自左主動脈竇，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合,。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道,，如電壓依賴性Na+通道,、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化,、超極化,，調節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖,、炎癥及凋亡等,。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞,，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用,。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產品：

小鼠小鼠透明質酸   英文名稱：   Mouse Hyaluronic Acid   規(guī)格：      英文縮寫：   HA

小鼠低氧誘導因子1a   英文名稱：   Hypoxia Inducible Factor 1a   規(guī)格：      英文縮寫：   HIF-1α

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小鼠組胺   英文名稱：   Histamine   規(guī)格：      英文縮寫：   HIS

小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒

HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit 人胰(PAMY)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNB試劑盒雞β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

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APC標記人CD71單克隆抗體

分揀微管連接蛋白抗體

ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

接觸蛋白2(CNTN2)重組蛋白 Recombinant Contactin 2 (CNTN2)

BOLA1重組人 BOLA1 蛋白 Protein

CDH5 Protein Human 重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標簽)

HA Protein H3N8 重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

接觸蛋白2(CNTN2)重組蛋白 Recombinant Contactin 2 (CNTN2)

CDH5 Protein Human 重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標簽)

ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H3N8 重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

BOLA1重組人 BOLA1 蛋白 Protein

大鼠冠狀動脈平滑肌細胞小鼠降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒

People mumps virus IgG ELISA Kit 人腮腺病毒IgG 試劑盒

HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人抗巨細胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50次

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理,？

1、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作