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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
組織來源：冠狀動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌分離自冠狀動(dòng)脈組織,；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,，起于主動(dòng)脈根部，分左右兩支,，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型,、均衡型,、左優(yōu)勢(shì)型,。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,，發(fā)自左主動(dòng)脈竇,，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分,，細(xì)胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道,、多種Ca2+通道和K+通道,；它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,，調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,，此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等,。因此,，原代分離培養(yǎng)的冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，對(duì)研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用,。冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠小鼠透明質(zhì)酸 英文名稱： Mouse Hyaluronic Acid 規(guī)格： 英文縮寫： HA
小鼠低氧誘導(dǎo)因子1a 英文名稱： Hypoxia Inducible Factor 1a 規(guī)格： 英文縮寫： HIF-1α
小鼠熱休克蛋白60 英文名稱： Heat shock protein 60 規(guī)格： 英文縮寫： Hsp-60
小鼠組胺 英文名稱： Histamine 規(guī)格： 英文縮寫： HIS
小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒
HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit 人胰(PAMY)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNB試劑盒雞β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞EGFR蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousegonadoopin-releasinghormone,GHELISAKit小鼠釋放激素(GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
APC標(biāo)記人CD71單克隆抗體
分揀微管連接蛋白抗體
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
接觸蛋白2(CNTN2)重組蛋白 Recombinant Contactin 2 (CNTN2)
BOLA1重組人 BOLA1 蛋白 Protein
CDH5 Protein Human 重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H3N8 重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
接觸蛋白2(CNTN2)重組蛋白 Recombinant Contactin 2 (CNTN2)
CDH5 Protein Human 重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H3N8 重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
BOLA1重組人 BOLA1 蛋白 Protein
大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒
People mumps virus IgG ELISA Kit 人腮腺病毒IgG 試劑盒
HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50次
Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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