詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
冠狀動脈 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7748 |
細胞簡介:
大鼠冠狀動脈成纖維分離自冠狀動脈組織,;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,,分左右兩支,,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型,、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支,。左冠狀動脈為一短干,,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,,沿冠狀溝向左前方行后,,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合,。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,,如電壓依賴性Na+通道,、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化,、超極化,,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖,、炎癥及凋亡等,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈成纖維采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右,;2代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物K1(VK1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物E(VE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物D3(VD3)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物D2(VD2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒
Human ai polymyositis scleroderma aibody (PM-Scl/PM-1) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)試劑盒
Porcinemaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAGEs(Mouseadvancedglycationendproducts)ELISAKit小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物
血液砷元素比色法定量試劑盒20次
Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)試劑盒
AlkB同源蛋白7抗體
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體
IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標簽) Protein
CK19 細胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細胞角蛋白19多肽抗原
LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標簽) Protein
AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標簽)
MME Protein Mouse 重組小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 標簽)
CK19 細胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細胞角蛋白19多肽抗原
AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標簽)
IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標簽) Protein
MME Protein Mouse 重組小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 標簽)
LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠冠狀動脈成纖維細胞小鼠角質(zhì)形成細胞衍生趨化因子|Murine KC (CXCL1)ELISA 試劑盒
Rat ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 大鼠抗粒/中心體抗體(ACA)試劑盒
HumancyclophilinA,CyPAELISAKit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒 進口分裝
HumanAicenomereAibody,ACA/CENP試劑盒人抗著絲點抗體(ACA/CENP)試劑盒
植物還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)試劑盒