詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞
組織來源:關(guān)節(jié)軟骨組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%
細胞簡介:
大鼠關(guān)節(jié)軟骨分離自關(guān)節(jié)軟骨組織;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,,表面光滑,、呈淡藍色、有光澤,,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,,同時當(dāng)受到壓力時候,,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間,,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,,這些軟骨細胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝,。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,,所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,,單個分布、體積較小,、呈橢圓形,,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,,細胞核圓形或卵圓形,、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,,常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群,。電鏡下,,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體,。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物A試劑盒 植物A試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 植物A試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:植物A試劑盒,、植物A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
大鼠白三烯B4試劑盒 大鼠白三烯B4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠白三烯B4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠白三烯B4試劑盒、大鼠白三烯B4 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
大鼠金屬硫蛋白試劑盒 大鼠金屬硫蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠金屬硫蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠金屬硫蛋白試劑盒,、大鼠金屬硫蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
大鼠白三烯C4試劑盒 大鼠白三烯C4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠白三烯C4試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:大鼠白三烯C4試劑盒、大鼠白三烯C4 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
植物玉米素(Z)試劑盒
Human ai rubella virus IgG aibody (ai-RV IgG) ELISA Kit 人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(ai-RV IgG)試劑盒
Porcinemacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit 豬巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAGA(Humanai-gliadinaibody)ELISAKit人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體
血液糖類總量鐵比色法定量試劑盒20次
Mousethyroxine,T4ELISAKit小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒
AF750標記的衰變加速因子CD55抗體
泛素特異性蛋白酶9X抗體
CD5重組大鼠 CD5 蛋白 Protein
FLG(filaggrin 0.5mgFLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原
CD164重組人 CD164 / Endolyn 蛋白 (His 標簽) Protein
ADM Protein Human 重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白
FGFR1 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標簽)
FLG(filaggrin 0.5mgFLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原
ADM Protein Human 重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白
CD5重組大鼠 CD5 蛋白 Protein
FGFR1 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標簽)
CD164重組人 CD164 / Endolyn 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒
Rat ai ypsin (AT) ELISA Kit 大鼠抗(AT)試劑盒
HumanCollectinELISAKit 人膠原凝集素(Collectin)試劑盒 進口分裝
Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNA試劑盒人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)試劑盒
植物原生質(zhì)細胞分離試劑盒5次
Humanα-Amylase,,AMS/AMYELISAKit人α(AMS/AMY)試劑盒
收到細胞如何處理?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作