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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：大鼠骨細(xì)胞
組織來(lái)源：骨組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 不增殖,；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠骨分離自骨組織；骨組織的細(xì)胞成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞,、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞,。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi)，其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣,。骨細(xì)胞（Osteocyte）是人體骨骼中最主要的細(xì)胞成分,。在成年人骨骼中，骨細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的90%～95%,，大約是成骨細(xì)胞數(shù)量的20倍,。骨細(xì)胞生長(zhǎng)在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細(xì)胞的細(xì)胞體呈梭形或類圓形,，位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi),。與神經(jīng)細(xì)胞類似，每個(gè)骨細(xì)胞具有大量向外延伸的突觸,，而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中,。通過這些突觸，骨細(xì)胞能夠與骨表面的細(xì)胞,、周圍其它的骨細(xì)胞進(jìn)行“交流",。普遍認(rèn)為，骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞,。在骨形成的終末階段,，成骨細(xì)胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細(xì)胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動(dòng)的成骨細(xì)胞,、進(jìn)入程序死亡過程（凋亡）,。骨細(xì)胞為扁橢圓形多突起的細(xì)胞，核亦扁圓,、染色深,。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下,，胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體,、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基復(fù)合體亦不發(fā)達(dá),。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi),。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中,，骨細(xì)胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔,，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管,。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連,。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液,，骨細(xì)胞從中獲得養(yǎng)分。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨采用膠原酶消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
質(zhì)粒大量提取試劑盒 5T
PlasmidMaxiKit 10T
質(zhì)粒中量提取試劑盒 50T
PlasmidMidiKit 100T
豬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒
Human ai albumin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗白蛋白抗體(AAA)試劑盒
PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit 豬白介素6(IL-6)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAHA(Humanai-Histoneaibody)ELISAKit人抗組蛋白抗體
血液牛病毒性腹瀉病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒
AF750標(biāo)記的雌激素受體α抗體
泛素蛋白連接酶J2抗體
IGFBP4重組人 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1(RB1)重組蛋白 Recombinant Retinoblastoma Protein 1 (RB1)
HIST2H4A重組人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白 Protein
AGRP Protein Human 重組人 AgRP / AGRP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1(RB1)重組蛋白 Recombinant Retinoblastoma Protein 1 (RB1)
AGRP Protein Human 重組人 AgRP / AGRP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGFBP4重組人 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HIST2H4A重組人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白 Protein
大鼠骨細(xì)胞小鼠解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA 試劑盒
Rat ai cardiolipin aibody IgM (ACA-IgM) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒
HumanCalreticulin,CELISAKit 人鈣網(wǎng)蛋白(C)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanai-calmodulinspecificaibody,CaM-ab試劑盒人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)試劑盒
植物核同糖1,5二0酸羧化/加氧酶(RUBPCase/Rubisco)加氧活性定量試劑盒20次
Humanα-glathioneS-ansferases,，α-GSTELISAKit人αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)試劑盒
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