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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
骨髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7743 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠骨髓單個(gè)核分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌,、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,，稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí),，紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞,，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,。注意這里是（mononuclear cell）單個(gè)核細(xì)胞，而不是（Monocyte）單核細(xì)胞,。單個(gè)核細(xì)胞的體積,、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同，利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,，可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核分離。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓單個(gè)核采用取骨髓,、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓單個(gè)核經(jīng)過(guò)檢測(cè),，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖,；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
植物C(VC)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物B6(VB6)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物B12(VB12)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物A(VA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬(EPI)ELISA 試劑盒
Human kallikrein 11 (KLK 11) ELISA Kit 人11(KLK 11)試劑盒
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANG(Humanangiostatin)ELISAKit人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白
血液(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體
蛋白質(zhì)精亞型3抗體
FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
過(guò)氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 Protein
ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標(biāo)簽)
過(guò)氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 Protein
大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒
Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒
Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒
植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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