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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：骨骼肌組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠骨骼肌分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱(chēng)橫紋肌,，肌肉中的一種,，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管,、淋巴分布,，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng),。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小、位置,、起止點(diǎn),、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌,、三角肌、梨狀肌等,。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,，不分支，有明顯橫紋,，核很多,，且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長(zhǎng)軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）,。明帶染色較淺，而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱(chēng)H線,。H線的中部有一M線。明帶中間,，有一條較暗的線稱(chēng)為Z線,。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段，叫做一個(gè)肌節(jié),。骨骼肌細(xì)胞也稱(chēng)橫紋肌細(xì)胞,，細(xì)胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方,，細(xì)胞多呈梭行,，具有一定的方向性。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨骼肌成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨骼肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
致病性大腸桿菌(EPEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
單增李斯特菌(LM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
球菌(SA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
甲型副氏菌(SPA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒
Human ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒
Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit 豬白介素3(IL-3)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAhCGAb(Humanai-chorionicgonadoopin-aibody)ELISAKit人抗人絨毛膜抗體
血液牛病毒性腹瀉病毒II型(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit小鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框196抗體
蛋白激酶C結(jié)合蛋白NELL2抗體
IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein
IL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原
CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
IL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原
AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA 試劑盒
Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒
Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAlpha-fetoprotein,AFP試劑盒人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒
植物半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒
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