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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7135 |
細(xì)胞簡介：
大鼠肝實質(zhì)分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機(jī)體中的腹部位置,，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方,。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一,。肝實質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化：急性肝炎,、肝硬化、肝膿腫,。肝實質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞,，生長營養(yǎng)需求高，在體外存活時間短,；細(xì)胞呈圓形或多角形,，核大而圓，居中,，常染色質(zhì)豐富,，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,，在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠肝實質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠肝實質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子樣弱凋亡因子（TWEAK）試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T
小鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 96T/48T
Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人軟骨素(CS)試劑盒
HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞RyR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織蛋白酶H輕連抗體
雌酮-3-葡糖苷酸抗體
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
SERPINF2重組人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein
CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SERPINF2重組人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein
大鼠肝實質(zhì)細(xì)胞小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA 試劑盒
Neuroophic factor of rat glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒
Humanneurofilameprotein,NFELISAKit 人神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanactivatedproteinC,APC試劑盒人活化蛋白C(APC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
脂質(zhì)過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)ELISA定量測定試劑盒48/96次
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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