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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肝動(dòng)脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7139 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮分離自肝動(dòng)脈組織,；在胚胎期,，肝臟有3條動(dòng)脈供血，分別來源于胃左動(dòng)脈,、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈，這3條動(dòng)脈分別的不同部位,。出生后,，一般保留一條動(dòng)脈，大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈,，由其分出左,、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝,。偶爾也可見起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈,。但也有2條動(dòng)脈并存的情況，如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈（25%）,，起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈（10%）,，而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見。此外,，還有5%像胚胎期一樣,，3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈,，如果肝臟沒有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),，此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈，如果在常見肝動(dòng)脈類型外,，還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流,，這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,，在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,，與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用，從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,，亦屬一類非專職抗原提呈細(xì)胞,。它們吞噬異物、細(xì)菌,、壞死和衰老的組織,，還參與集體免疫活動(dòng)，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓,；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）,；③動(dòng)脈硬化；④血管生成,；⑤炎癥及腫脹（浮腫）,；⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì)，如白血球進(jìn)出血管,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
蔗糖合成酶（SS）試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
蔗糖0酸合成酶（SPS）試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
海藻糖含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
蔗糖酶試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
植物過氧化物酶(POD)試劑盒
Human ai ribosomal P protein aibody (ARPA/Rib-P) ELISA Kit 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒
PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 豬載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAECA(Mouseai-endothelialcellaibody)ELISAKit小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體
血液氧化型(GSSG)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)核蛋白1抗體
玻璃粘連蛋白抗體
CNDP1重組人 CNDP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)重組蛋白 Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)
RAB6A重組人 Rab6 / Rab GTPases / RAB6A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACPL2 Protein Human 重組人 ACPL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1 (KAN-1) /2004) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (His 標(biāo)簽)
硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)重組蛋白 Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)
ACPL2 Protein Human 重組人 ACPL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CNDP1重組人 CNDP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
NA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1 (KAN-1) /2004) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (His 標(biāo)簽)
RAB6A重組人 Rab6 / Rab GTPases / RAB6A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒
Rat basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)試劑盒
HumanelonginELISAKit 人延伸蛋白(elongin)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒
正常女性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒
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