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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺小動脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7742 |
細(xì)胞簡介：
大鼠肺小動脈平滑肌分離自肺小動脈組織；小動脈（smallartery）,，管徑在0.3～1mm之間,，小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支，也屬肌性動脈,。較大的小動脈,，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜，中膜有幾層平滑肌,，外膜厚度與中膜相近,，一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)",。典型的小動脈，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2,。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,，當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時，其管腔可以閉塞,，而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),，從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,，可使血壓顯著上升,。反之，當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,，則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,，外周阻力明顯下降，血壓降低,。終末小動脈（terminal arteri-ole）的口徑為20～30μm,；后小動脈（metar-teriole），又稱毛細(xì)血管前小動脈（precapil-lary arteriole）的口徑為12～15μm,。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,，在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚,，叫做毛細(xì)血管前括約?。?span>precapillary sphinc-ter），其收縮或舒張,，可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺小動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺小動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,；
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
瑞氏－姬姆薩復(fù)合染液 Vascular permeability test solion
姬姆薩染液 Peroxidase staining
巴氏染液（脫落細(xì)胞染色） Name
快速H－E組織細(xì)胞及脫落細(xì)胞染液 Phosphate buffer
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)試劑盒E
Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK試劑盒人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織EPHB4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProgesterone,，PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)錄激活蛋白CRSP9抗體
白細(xì)胞介素增強(qiáng)子結(jié)合因子2抗體
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒
Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒
HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP試劑盒魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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