大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 NDUAB蛋白抗體 大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞 小鼠支氣管上皮細(xì)胞 小鼠腹水瘤細(xì)胞；EAC-E2G8 M2-10B4 (小鼠骨髓纖維原細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源：肺動脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞簡介：

大鼠肺大動脈平滑肌分離自肺大動脈組織；肺大動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,，在主動脈之前向左上后方斜行,，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,，經(jīng)肺門入肺,。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干,。起自右心室,，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行,，分二支進(jìn)入左肺上,、下葉。右肺動脈較長而粗,，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中,、下葉,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細(xì)胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,，急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓,，即缺氧性肺動脈高壓，推斷缺氧可能是通過促進(jìn)肺大動脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應(yīng),；②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。肺大動脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓,；②先天性肺動脈狹窄,；③肺動脈栓塞。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠肺大動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠肺大動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細(xì)胞如何處理？

1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

人周期素依賴性激酶5(CDK-5)試劑盒   96T/48T

人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒   96T/48T

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)試劑盒   96T/48T

人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒   96T/48T

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytokeratin 20 (CK-20) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)試劑盒

Humanai-scleroderma70aibody,SCL70/topoⅠELISAKit 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCyclin-D2試劑盒人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA規(guī)格：96T/48T

組織FLT3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)試劑盒規(guī)格：96T/48T

腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體

β淀粉樣肽（1-40）抗體

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA 試劑盒

Human urinary protein (UP) ELISA Kit 人尿蛋白(UP)試劑盒

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineapigleukoieneD4,LT-D4試劑盒豚鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞壁可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseCA724ELISAKit小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)試劑盒規(guī)格：96T/48T