詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺動脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7052 |
細(xì)胞簡介:
大鼠肺大動脈內(nèi)皮分離自肺大動脈組織;肺大動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,,在主動脈之前向左上后方斜行,,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,,經(jīng)肺門入肺,。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干,。起自右心室,,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,,分二支進(jìn)入左肺上,、下葉。右肺動脈較長而粗,,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中,、下葉,。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡,、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡,、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肺大動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肺大動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人總鐵結(jié)合力(TIBC)試劑盒 96T/48T
人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒 96T/48T
人總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒 96T/48T
人總蛋白(TP)試劑盒 96T/48T
豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)試劑盒
HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTP試劑盒人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織D-葡萄糖激酶法定量試劑盒20次
HumanProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
腫瘤/睪丸抗原62抗體
α-輔肌動蛋白4重組兔單克隆抗體
CDH1重組小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病毒H1N1-M2蛋白
USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AHSP重組人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein
大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒
Human visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒
HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 人表面活性蛋白D(SP-D)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
guineapighepatocytegrowthfactor,HGF試劑盒豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量試劑盒20次
MouseCeruloplasmin,CP/CERELISAKit小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)試劑盒規(guī)格:96T/48T