詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠大隱靜脈平滑肌細胞
組織來源:大隱靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞簡介:
大鼠大隱靜脈平滑肌分離自大隱靜脈,;大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端,經(jīng)內(nèi)踝前方,,沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行,,經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方,進入大腿內(nèi)側(cè)部,與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行,,逐漸向前上,,在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔,匯入股靜脈,,其匯入點稱為隱股點,。有5條屬支:旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈,、試劑盒外靜脈,、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈,它們匯入大隱靜脈的形式多樣,,相互間吻合豐富,。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時,須分別結(jié)扎,、切斷各屬支,,以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能:①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素,;②參與血管壁的炎癥反應(yīng),,并與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。因此,,研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料,。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠大隱靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠大隱靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 96T/48T
小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒 96T/48T
小鼠脫氫表雄酯(DHEA-S)試劑盒 96T/48T
小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)試劑盒 96T/48T
小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒
Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit 人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenParathyroidhormone,PTH試劑盒雞甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞PAR-1蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFolicacid,FAELISAKit小鼠(FA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
整合素樣金屬蛋白酶與1型-12抗體
TWIST蛋白2抗體抗體
NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) Protein
phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein
CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白
phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) Protein
PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白
EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein
大鼠大隱靜脈平滑肌細胞小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒
One set of membrane protein (iNV) ELISA Kit 人套膜蛋白(iNV)試劑盒
Humanglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanbonesialoprotein,BSP試劑盒人骨涎蛋白(BSP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50次
HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit人葡萄球菌蛋白A(SPA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細胞如何處理,?
1、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作