詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
顱骨組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7316 |
細胞簡介:
大鼠成骨分離自顱骨組織,;顱骨位于脊柱上方,,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外,,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用,。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,內(nèi)有顱腔,,容納腦,,共8塊。面顱為顱的前下部分,,包含眶,、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu),,構(gòu)成面部的支架,,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),,分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),,形成骨吸收陷窩;其后,,成骨細胞移行至被吸收部位,,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨,;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學(xué)基礎(chǔ),,也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠成骨采用先用短時間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠成骨經(jīng)ALP染色檢測,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
腮腺病毒(MuV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
麻風(fēng)桿菌(ML)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 ,,英文名: IgA ELISA Kit
Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒
Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白
細菌檸檬酸利用試劑盒20次
rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
著絲粒蛋白L抗體
tinagl1抗體
NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原
PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein
IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原
IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein
GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白
PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein
大鼠成骨細胞小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒
Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒
Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1試劑盒雞可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)試劑盒規(guī)格:96T/48T