詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠腸道干細(xì)胞
組織來源:腸組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠腸道干分離自腸道組織,;腸道指的是從胃幽門至x的消化管,。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸道干細(xì)胞(ISC)也稱腸道上皮干細(xì)胞,主要位于腸黏膜隱窩內(nèi),,其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān),。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,,整個遷移過程大約3-5d,,在遷移過程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞,。當(dāng)受到外界生理或病理信號作用時,ISC可持續(xù)增殖,、分化為成熟腸上皮細(xì)胞,,如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞,、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等,,從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腸道干采用-膠原酶聯(lián)合消化后,,用腸道干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腸道干經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 英文縮寫: FASN
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生長激素結(jié)合蛋白 英文名稱: GH-binding protein 規(guī)格: 英文縮寫: P
環(huán)0酸鳥苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規(guī)格: 英文縮寫: cGMP
植物脯酸(proline)ELISA 試劑盒
Human ai red cell aibody (RBC) ELISA Kit 人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)檢測試劑盒
Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforADV-Ag(HumanAdenovirusAigen)ELISAKit人腺病毒抗原
血液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Mousesolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測試劑盒
應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1抗體
RNA結(jié)合蛋白6抗體
TDGF1重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Cyclin D3(C-term 0.5mgCyclin D3(C-term) 周期素D3抗原
FABP6重組人 FABP6 / I-BABP 蛋白 Protein
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Cyclin D3(C-term 0.5mgCyclin D3(C-term) 周期素D3抗原
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TDGF1重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FABP6重組人 FABP6 / I-BABP 蛋白 Protein
大鼠腸道干細(xì)胞小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒
Rat azidothymidine (AZT) ELISA Kit 大鼠(AZT)檢測試劑盒
HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(Mouseai-IVIgGaibody)ELISAKit小鼠抗IVIgG抗體
飲料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
MouseIerleukin5,IL-5ELISAKit小鼠白介素-5(IL-5)檢測試劑盒