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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 長梭形 | YS-01X7332 |
細胞簡介：
大鼠表皮黑色素分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層,，由胚胎時期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層，即基底層,、棘層,、顆粒層、透明層和角質(zhì)層,。黑色素細胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細胞,，起源于神經(jīng)嵴，后逐漸遷移到表皮和毛囊,。黑色素細胞的異?；蚬δ艿氖С?dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生，如,、黃褐斑等,。表皮黑色素細胞主要分布于位于表皮的基底層，與表皮細胞共同組成表皮黑素單位,，其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護皮膚免受損害,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠表皮黑色素細胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠表皮黑色素經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 長梭形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
月桂?；溠刻擒?span> 1g
N-Dodecyl-β-Maltoside
新 5g
NeomycinSulfate 25g
魚脫酶3(DIO3)ELISA檢測試劑盒 ELISA 組裝/原裝
Human ai IgG aibody to hepatitis A virus (ai-HAV) ELISA Kit 人抗甲型肝病毒IgG抗體(ai-HAV)檢測試劑盒
Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit 豬白介素17(IL-17)檢測試劑盒 進口分裝
ADVIgGXI腺病毒IgGⅪ型(間接法二步法)
血液合成酶總活性熒光定量檢測試劑盒20次
Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)檢測試劑盒
胰島細胞自身抗原1抗體
PTB結(jié)合核蛋白2抗體
DLL4重組人 DLL4 蛋白 Protein
趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)
MMP12重組人 MMP12 / MMP-12 / HME 蛋白 (catalytic domain) Protein
ABL1 Protein Human 重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標簽)
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)
ABL1 Protein Human 重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標簽)
DLL4重組人 DLL4 蛋白 Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
MMP12重組人 MMP12 / MMP-12 / HME 蛋白 (catalytic domain) Protein
大鼠表皮黑色素細胞小鼠胰淀素(Amylin)ELISA 試劑盒
Rat big endothelin (Big ET) ELISA Kit 大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)檢測試劑盒
HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 人補體片斷4b(C4b)檢測試劑盒 進口分裝
CLIAKitfor5-HIAA(Human5-hydroxyindolaceticacid)ELISAKit人5羥基吲哚乙酸
飲料同酸比色法定量檢測試劑盒20次
Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit小鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)檢測試劑盒
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