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產(chǎn)品名稱：大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

組織來(lái)源：外周血

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

RPMI-1640,、FBS、樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)添加劑,、Glutamine,、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠外周血DC分離自外周血,，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。DC細(xì)胞,，全稱樹突狀細(xì)胞（DC），是近年來(lái)倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞（APC）,，能攝取,、加工及呈遞抗原，啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),。由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),，從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,，因其細(xì)胞膜向外伸出,，形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起，故而命名為樹突狀細(xì)胞,。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng),、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。

方法簡(jiǎn)介：

見說明

質(zhì)量檢測(cè)：

本公司生產(chǎn)的大鼠外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,；細(xì)胞純度可達(dá)85%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

人粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   ELISA   組裝/原裝

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒   96T/48T

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒   96T/48T

人早老素2(PS-2)檢測(cè)試劑盒   96T/48T

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL1Ra ELISA Kit

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)檢測(cè)試劑盒

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-CG(MouseChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit小鼠絨毛膜β

細(xì)菌乙醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

胰島素受體α抗體

PITX3抗體

CD274重組人 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

精酶(ARG)重組蛋白 Recombinant Arginase (ARG)

FAM171B重組人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ITCH Protein Human 重組人 ITCH / AIP4 蛋白 (aa 526-903)

HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

精酶(ARG)重組蛋白 Recombinant Arginase (ARG)

ITCH Protein Human 重組人 ITCH / AIP4 蛋白 (aa 526-903)

CD274重組人 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H15N2 重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

FAM171B重組人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒

Human anspoer associated with aigen processing (TAP) ELISA Kit 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)檢測(cè)試劑盒

Humahymusindependeaigen,TI-AgELISAKit 人非依賴性抗原(TI-Ag)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAAA(Humanai-Actinaibody)ELISAKit人抗肌動(dòng)蛋白抗體

胰腺脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作