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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脾臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細胞 | YS-01X7537 |
細胞簡介：
大鼠脾淋巴分離自脾臟組織,；脾臟是機體最大的免疫器官,，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,，是機體細胞免疫和體液免疫的中心,。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對,，長軸與第10肋一致,。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃,，后方與左腎,、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰,，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞器官,。淋巴細胞（lymphocyte）白細胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生,，機體免疫應答功能的重要細胞成分,。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異，可分為中樞淋巴器官（又名初級淋巴器官）和周圍淋巴器官（又名次級淋巴器官）兩類,。前者包括胸腺,、腔上囊或其相當器官（有人認為在哺乳動物是骨髓）。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞,，成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官,。后者包括脾、淋巴結(jié)等,。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖,，繼而發(fā)揮其免疫功能,。
方法簡介：
見說明
質(zhì)量檢測：
本公司生產(chǎn)的大鼠脾淋巴采用機械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10^6cells/瓶,；細胞純度可達95%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
RPMI-1640,、FBS,、淋巴細胞生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人重去甲上腺素(NE-B)檢測試劑盒 96T/48T
人血管生長因子(TAF)檢測試劑盒 96T/48T
人相關抗原(TAA)檢測試劑盒 96T/48T
人特異性抗原(TSA)檢測試劑盒 96T/48T
豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測試劑盒 ,，英文名： ACTH ELISA Kit
Many people immunoglobulin receptor (poly-IgR) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)檢測試劑盒
rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A
細菌細胞色素氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明質(zhì)酸(HA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
羊抗人球蛋白A
PE標記人CD45RB單克隆抗體
FZD5重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
神經(jīng)生長因子(NGF)重組蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
TRIP10重組人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
神經(jīng)生長因子(NGF)重組蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白
FZD5重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
TRIP10重組人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
大鼠脾淋巴細胞豬肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒
Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)檢測試劑盒
PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-銀環(huán)蛇毒素
血液賴(lysine)含量化學比色法定量檢測試劑盒20次
NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
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