詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺靜脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細(xì)胞 | YS-01X7042 |
細(xì)胞簡介:
大鼠肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,,共4條,,兩條連接右肺,兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓,。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應(yīng)性大的特點,,肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài),,必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈,,再入左心室,,經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán),才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高,。肺大靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。該細(xì)胞參與血管壁炎癥反應(yīng),,保持靜脈管腔的通暢,,還是多數(shù)動脈疾病的靶細(xì)胞。
方法簡介:
見說明
質(zhì)量檢測:
本公司生產(chǎn)的大鼠肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,;經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
DMEM[H],、FBS、平滑肌細(xì)胞生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人原鈣黏素1(PCDH1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit
人原鈣黏素β2(PCDHβ2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PCDHβ2 (Protocadherin Beta 2) ELISA Kit
人原纖蛋白1(FBN1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit
人原纖蛋白2(FBN2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒 ,,英文名: IFN-γ ELISA Kit
Human mast cell yptase (MCT) ELISA Kit 人肥大細(xì)胞類(MCT)檢測試劑盒
rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 兔子促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta2-GP1AbIgG(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgG)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgG
細(xì)菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
嗅覺受體家族5亞基1抗體
Pacific Blue標(biāo)記人CD56 (NCAM)單克隆抗體
IL20RA重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret,、mouse MYOZ抗原
COL2A1重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽) Protein
KCNIP3 Protein Human 重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白
MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白
MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human,、ret、mouse MYOZ抗原
KCNIP3 Protein Human 重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白
IL20RA重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白
COL2A1重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞豬透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)檢測試劑盒
GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANG-R-Tie1ELISAKit大鼠血管生成素受體Tie1
血液超氧化物陰離子化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
PorcineFollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit豬促卵泡素(FSH)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。