大鼠瘢痕疙瘩成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人肺微血管內(nèi)皮細胞;HPMVEC WiDr人結(jié)腸癌細胞 SGEF蛋白抗體 SW837 (人結(jié)直腸腺癌上皮細胞) 白介素14抗體 B95-8 (絨猴EB病毒轉(zhuǎn)化的白細胞) 環(huán)指蛋白34抗體 鋅指/環(huán)指蛋白4抗體

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產(chǎn)品名稱：大鼠瘢痕疙瘩成纖維細胞

組織來源：皮膚

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

大鼠瘢痕疙瘩成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

細胞簡介：

大鼠瘢痕疙瘩成纖維分離自皮膚瘢痕疙瘩組織,；瘢痕疙瘩，俗稱疤痕疙瘩,，是皮膚傷口愈合或不明原因所致皮膚損傷愈合后所形成的過度生長的異常瘢痕組織,，目前學(xué)術(shù)界認為各種原因?qū)е碌鸟：廴缇哂幸韵绿攸c，可診斷為瘢痕疙瘩：①病變超過原始皮膚損傷范圍,；②呈持續(xù)性生長,；③高起皮膚表面、質(zhì)硬韌,、顏色發(fā)紅的結(jié)節(jié)狀,、條索狀或片狀腫塊。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的瘢痕疙瘩成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。瘢痕疙瘩成纖維細胞同正常皮膚成纖維細胞在形態(tài)上沒有表現(xiàn)出明顯的差異。瘢痕疙瘩成纖維細胞生長同正常皮膚成纖維細胞的生長沒有明顯的差別,。癜痕成纖維細胞對血清的依賴性低于正常皮膚成纖維細胞,。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠瘢痕疙瘩成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的大鼠瘢痕疙瘩成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）,、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

兔核因子κ B   英文名稱：   Rabbit Nuclear factor κB   規(guī)格：      英文縮寫：   NFkB

兔骨保護素<破骨細胞抑制因子>   英文名稱：   Rabbit Osteoprotegerin   規(guī)格：      英文縮寫：   OPG

兔血小板活化因子   英文名稱：   Rabbit Platelet Activating Factor   規(guī)格：      英文縮寫：   PAF

兔蛋白激酶A   英文名稱：   Rabbit Protein Kinase A   規(guī)格：      英文縮寫：   PKA

小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin E (VE) ELISA Kit 大鼠(VE)試劑盒

Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 人5羥色胺(5-HT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancolony-stimulatingfactor,CSF試劑盒人集落刺激因子(CSF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織AURORA-B激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPyridinoline,PYDELISAKit人酚(PYD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

STAC1蛋白抗體

結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) Protein

盤狀結(jié)構(gòu)域受體家族成員1(DDR1)重組蛋白 Recombinant Discoidin Domain Receptor Family, Member 1 (DDR1)

NPC2重組人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 蛋白 Protein

HSP90AA1 Protein Human 重組人 HSP90AA1 / HSP90 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

盤狀結(jié)構(gòu)域受體家族成員1(DDR1)重組蛋白 Recombinant Discoidin Domain Receptor Family, Member 1 (DDR1)

HSP90AA1 Protein Human 重組人 HSP90AA1 / HSP90 蛋白

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

NPC2重組人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 蛋白 Protein

大鼠瘢痕疙瘩成纖維細胞大鼠波形蛋白(VIM)試劑盒 ，英文名： VIM ELISA Kit

Mouse alpha L iduronidase (IDUA) ELISA Kit 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒

ELISA 小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(mouse ECP)  進口分裝

CLIAKitforKLK6(HumanKallikrein6)ELISAKit人6

通用型腸桿菌(EerobacteriaceaSTX1)試劑盒20次

ELISAKithiston-H2b大鼠組蛋白H2b

收到細胞如何處理,？

1,、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作