大鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：MPP4蛋白抗體 SU-DHL-4（人B淋巴瘤細(xì)胞） 兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 丙肝病毒NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體 小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 羥類固醇脫氫酶17β2抗體 人小梁網(wǎng)細(xì)胞 磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體

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產(chǎn)品名稱：大鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源：鼻黏膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠鼻黏膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠鼻黏膜成纖維分離自鼻黏膜組織,；黏膜是覆蓋在機(jī)體內(nèi)消化,、呼吸、泌尿,、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,，有口腔黏膜,、胃腸黏膜、鼻腔黏膜,、氣管黏膜,、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能,、部位不一而不盡相同,。鼻腔黏膜，簡(jiǎn)稱鼻黏膜,，覆蓋于鼻腔表面,，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌,。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦,、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過(guò)成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鼻黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

兔睪(rabbit TESTO)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔抗酸性0酸酶5b(rabbit ACP-5b)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔血栓調(diào)節(jié)蛋白(rabbit TM)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔壞死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠CD163分子(CD163) 試劑盒 96T/48T

Rat motilin (MTL) ELISA Kit 大鼠胃動(dòng)素(MTL)試劑盒

Humahyroxineaibody,TAbELISAKit 人甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCompleme3splitproduct,C3SP試劑盒人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次

HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinD,SP-DELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Tat結(jié)合蛋白7抗體

緊密連接蛋白25抗體

HDAC8重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白 Protein

Dermokine蛋白(DMKN)重組蛋白 Recombinant Dermokine (DMKN)

IL27重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 Protein

HSPD1 Protein Human 重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CD86 Protein Rat 重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白

V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)重組蛋白 Recombinant V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A (RELA)

HSPD1 Protein Human 重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

PRDX5重組小鼠 Peroxiredoxin 5 / PRDX5 蛋白 Protein

BTLA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

RAMP3重組人 RAMP3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞大鼠別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)試劑盒 ，英文名： AP/3α,5α-THP ELISA Kit

Mouse alpha glucosidase (alpha -glucosidase) ELISA Kit 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒

ELISA 小鼠凋亡相關(guān)因子(mouse Fas)  進(jìn)口分裝

CLIAKitfom-1(HumanKidneyinjurymolecule1)ELISAKit人腎損傷分子1

通用型蛋白免疫共沉淀(蛋白A樹脂)試劑盒10次

ELISAKitMHCⅢ/H-1Ⅲ大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作