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大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X8222 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞 早老素蛋白-2抗體 NCI-H1650 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 CaSKi人宮頸癌細(xì)胞 大鼠牙周膜干細(xì)胞 NCI-H1688 (人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞

大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

腸系膜

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8222

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠腸系膜平滑肌分離自腸系膜動(dòng)脈組織,;腸道指的是從胃幽門(mén)至門(mén)的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,,也是功能最重要的一段,。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,,大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便,,再通過(guò)直腸經(jīng)門(mén)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動(dòng)脈由背大動(dòng)脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),,分布于消化管的動(dòng)脈,。分成腸系膜上動(dòng)脈和腸系膜下動(dòng)脈。前者主要分布于小腸左側(cè),,后者分布于結(jié)腸,、大腸、泄殖腔等處,。腸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀,;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸系膜平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸系膜平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%CO2,,5%

大鼠腸系膜平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔子白介素9(IL-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human P-selectin (omein) ELISA Kit 人網(wǎng)膜素(omein)試劑盒

HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit 人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCathepsinK,cath-K試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)RF3品系試劑盒20

Humansignalrecognizationpaicleaibody,SRPELISAKit人抗信號(hào)識(shí)別顆??贵w(SRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

T細(xì)胞白血病淋巴瘤蛋白3抗體

聚磷酸肌醇磷酸酶5B抗體

CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein

血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽)

血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)

GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白

CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)試劑盒 ,,英文名: cPLA2 ELISA Kit

Mouse beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒

ELISA 小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforITF(HumanIestinalefoilfactor)ELISAKit人腸三葉因子

通用型丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20

AIL-R3大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3


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