詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:肺動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮分離自肺動(dòng)脈組織;肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干,。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺動(dòng)脈起于右心室,,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡,、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡,、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用,。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子促甲狀腺素(TSH)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子促黃體激素(LH)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子雌二醇(E2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素11(IL-11)ELISA 試劑盒
Rat neuroophin 3 (-3) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒
Humanosteonectin,ONELISAKit 人骨粘連蛋白(ON)試劑盒 進(jìn)口分裝
humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase,Casp4試劑盒人哆/哆醇B6激酶(PDXK)試劑盒
轉(zhuǎn)基因水稻LibeyLink62品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA4933429F08geneELISAKit人類似RIKENcDNA4933429F08基因試劑盒
ZC3H8蛋白抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體
F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
factor V(Vcoagulation factor 0.5mgfactor V(Vcoagulation factor) 5抗體
MIF重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
GNG13 Protein Human 重組人 GNG13 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD209B Protein Mouse 重組小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
factor V(Vcoagulation factor 0.5mgfactor V(Vcoagulation factor) 5抗體
GNG13 Protein Human 重組人 GNG13 蛋白 (His 標(biāo)簽)
F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD209B Protein Mouse 重組小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MIF重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒 ,,英文名: Cys-C ELISA Kit
Mouse beta mannosidase (beta Manase) ELISA Kit 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)試劑盒
ELISA 小鼠Fractalkine(mouse Fractalkine) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforISR-BetaELISAKit大鼠胰島素受體β
通用型丁酰酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次
ELISAKitTNFsR-Ⅱ大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作