詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠肺微血管平滑肌細(xì)胞
組織來源:肺
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
大鼠肺微血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
大鼠肺微血管平滑肌分離自肺組織,;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,,左右各一,,覆蓋于心之上。肺有分葉,,左二右三,,共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉,、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅,。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng),;②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓,;②先天性肺動脈狹窄,;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,,最新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),,并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠肺微血管平滑肌采用混合膠原酶消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠肺微血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子白介素9(IL-9)試劑盒 96T/48T
兔子白介素4(IL-4)試劑盒 96T/48T
兔子白介素3(IL-3)試劑盒 96T/48T
兔子白介素2(IL-2)試劑盒 96T/48T
小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA 試劑盒 96T/48T
Human endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒
Humanβai-galactanproteinsIgGELISAKit 人β乳糖蛋白抗體IgG試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
guineapigEndothelin1,ET-1試劑盒豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20次
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α-(1,3)-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶 4抗體
顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體
IL8重組食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白 Protein
Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin 0.5mgLivin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin) 一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)
IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 Protein
GOT1 Protein Human 重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白
TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標(biāo)簽)
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大鼠肺微血管平滑肌細(xì)胞大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 ,英文名: LIFR ELISA Kit
Mouse beta endorphin (beta -EP) ELISA Kit 小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒
ELISA 小鼠X(mouse FX) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforiso-Hyd(HumanIsoprenalineHydrochloride)ELISAKit人異
通用型丁酰酯酶活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitTNFsR-Ⅰ大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ