化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：大鼠附睪上皮細(xì)胞
組織來源：附睪
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、EGF,、Hydrocortisone、腎上腺素,、甲狀腺素,、Insulin、Transferrin,、Selenium Solution,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
大鼠附睪上皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀
細(xì)胞簡介：
大鼠附睪上皮分離自附睪組織；附睪（Epididymis）是一個(gè)由曲折,、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,，一端接著輸精管（Ductusdeferens），一端接著睪丸（Testis）的曲細(xì)精管，具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管,。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,，可分為頭、體,、尾三部,。精子離開睪丸后通過輸出小管進(jìn)入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)精子的功能,，以促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存精子,，促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動(dòng)能力,，總共停留8～17天,，最終達(dá)到功能上的成熟。在這個(gè)過程中,，精子除了自身的因素,，還受到附睪微環(huán)境的影響，這包括了一系列的物理,、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變,。可以說,，附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件,。若附睪的功能發(fā)生異常，精子則不能成熟,，引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞,、基細(xì)胞,、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞?；?xì)胞,，其頂部離附睪管腔有一定距離，在附睪各部分,，其形態(tài)沒有差別,，一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞；另一種主細(xì)胞,，是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ),，在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大，這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異,。除上皮細(xì)胞外,，附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化，附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮，而尾部平滑肌就沒有這種特點(diǎn),，僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮,。作為負(fù)責(zé)提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪，具有活躍的分泌與吸收功能,。其中,，附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn)，對保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度,，為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用,。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液，如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,，而從附睪排出的只不過幾百微升,，也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,，結(jié)扎輸精管時(shí)睪丸不會腫脹,，但若結(jié)扎睪丸輸出小管，睪丸第二天就會腫脹,，這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能,，但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對精子的發(fā)育,、成熟,，，附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義,。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠附睪上皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠附睪上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
三0酸腺苷酶 英文名稱： Rat Adenosine iphosphate 規(guī)格： 英文縮寫： ATP
大鼠半胱天冬蛋白酶3 英文名稱： active cysteine-aspaic acid protease-3 規(guī)格： 英文縮寫： Active Caspase-3
大鼠半胱天冬蛋白酶7 英文名稱： active cysteine-aspaic acid protease-7 規(guī)格： 英文縮寫： Active Caspase-7
大鼠半胱天冬蛋白酶8 英文名稱： active cysteine-aspaic acid protease-8 規(guī)格： 英文縮寫： Active Caspase-8
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytotoxin (CTX) ELISA Kit 人細(xì)胞毒素(CTX)試劑盒
Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit 人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humanC-typelectindomainfamily4membere,CLEC4E試劑盒人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織EPHB2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProinsulin,PIELISAKit人胰島素原(PI)試劑盒規(guī)格：96T/48T
β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體
跨膜蛋白9家族成員4抗體
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
phospho-Smad2(p-Ser465 0.5mgphospho-Smad2(p-Ser465)petide 0酸化Smad2抗原
COCH重組人 Cochlin / COCH 蛋白 Protein
IL17RB Protein Human 重組人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
phospho-Smad2(p-Ser465 0.5mgphospho-Smad2(p-Ser465)petide 0酸化Smad2抗原
IL17RB Protein Human 重組人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
COCH重組人 Cochlin / COCH 蛋白 Protein
大鼠附睪上皮細(xì)胞大鼠白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)試劑盒 ,，英文名： HLA-DR ELISA Kit
Lactamase inhibitors (BLI) ELISA Kit 小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)試劑盒
ELISA 小鼠Foxp3(mouse Foxp3) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforirGH(HumanImmunoreactivegrowthhormone)ELISAKit人免疫反應(yīng)性生長激素
通用型(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒50次
ELISAKitTNF-α大鼠腫瘤壞死因子α
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
化工儀器網(wǎng)