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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肝 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X8229 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠肝非實(shí)質(zhì)分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接,。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞具有肝功能的單位,，是肝臟的基本組成單位之一。肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指除了肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞之外的細(xì)胞,，主要包含了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞,、肝枯否細(xì)胞,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝非實(shí)質(zhì)采用取肝臟灌流,、膠原酶消化,、密度梯度離心法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝非實(shí)質(zhì)經(jīng)過檢測(cè),，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
大鼠肝非實(shí)質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠蛋白激酶A 英文名稱： Mouse Protein Kinase A 規(guī)格： 英文縮寫： PKA
小鼠降鈣素原 英文名稱： Mouse procalcitonin 規(guī)格： 英文縮寫： PCT
小鼠血小板活化因子 英文名稱： platelet active factor 規(guī)格： 英文縮寫： PAF
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 英文名稱： plasmin-aiplasmin complex 規(guī)格： 英文縮寫： PAP
小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞衍生趨化因子|Murine KC (CXCL1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒
HumancyclophilinA,CyPAELISAKit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAicenomereAibody,ACA/CENP試劑盒人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)試劑盒規(guī)格：96T/48T
癌胚抗原抗體
賴特異性脫甲基酶4B抗體
CX3CL1重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NPY ( Neuropeptide Y 0.5mgNPY ( Neuropeptide Y) 神經(jīng)肽 Y(抗原)
TREM1重組人 TREM1 蛋白 Protein
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NPY ( Neuropeptide Y 0.5mgNPY ( Neuropeptide Y) 神經(jīng)肽 Y(抗原)
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
CX3CL1重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TREM1重組人 TREM1 蛋白 Protein
大鼠肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞大鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)試劑盒 ，英文名： IL-4 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 1 beta (MIP-1 beta /CCL4) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒
MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhumanorosomucoid2,ORM2ELISAKit人類粘蛋白2
同位素核酸(酶切產(chǎn)物)蛋白結(jié)合甲基化干擾足跡法分析試劑盒10次
ELISAKitCC16大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白
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