詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X8230 |
細胞簡介:
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮分離自骨組織,;股骨頭(caput femoris)呈圓形,,約占一圓球的2/3,其上為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋,,在其頂部微后有一小窩,,稱為股骨頭凹,為股骨頭韌帶附著處,,股骨頭可由此獲得少量血供,。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀,后毛細血管微動脈與微靜脈部分膨大,、迂曲,、互相纏繞;骨微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯,,與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切,,參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮采用混合膠原酶消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,細胞純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS、EGF,、bFGF,、IGF、VEGF,、Heparin,、Hydrocortisone、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳1-3代左右,;2代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠蛋白激酶A(PKA)試劑盒 96T/48T
小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)試劑盒 96T/48T
小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 96T/48T
小鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 96T/48T
小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human breast cancer susceptibility protein 1 (BFAA-1) ELISA Kit 人癌易感蛋白1(BFAA-1)試劑盒
HumandysophinELISAKit 人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-cenolandcenosomeaibody,ACA試劑盒人抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物還原型(GSH)濃度比色法定量試劑盒50次
Humanα-Actinin3,,ACTN-3ELISAKit人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
巴豆酰組蛋白H2B重組兔單克隆抗體
酪激酶B單克隆抗體
RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白
C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重組產(chǎn)氣莢膜梭菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白
RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重組產(chǎn)氣莢膜梭菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細胞大鼠白細胞介素2(IL-2)試劑盒 ,,英文名: IL-2 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞性蛋白2(MIP-2)試劑盒
Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相關(guān)蛋白
同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒20次
sAIL大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行