大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠成纖維細(xì)胞+LUC;L929-LUC-GFP-PURO 兔軟骨細(xì)胞 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體 人間質(zhì)大細(xì)胞淋巴瘤;FE-PD G氨基丁酸A型受體α4/GABAA Rα4抗體 U266人骨髓瘤細(xì)胞 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)接頭蛋白2抗體 RS1 (大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：骨骼肌

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2，5%

大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮分離自四肢肌肉組織,；骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種，約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官,，有豐富的血管、淋巴分布,，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。微血管又稱毛細(xì)血管,。分布于各種組織和細(xì)胞間的最微細(xì)的血管,。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米,，數(shù)量極多,，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,，厚約0.5微米,。基膜外面有薄層結(jié)締組織,，其中有纖維細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等,。最細(xì)的微血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔，較粗的微血管由2-3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成,。分布于肌肉組織,、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃）,，稱連續(xù)微血管,。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān),。近年來血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥,、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn),，不同來源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征,、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞,，它們又存在器官和組織的特異性,。骨骼肌組織是動(dòng)物體內(nèi)含量最多的組織，肌肉組織供血豐富,，是研究?jī)?nèi)皮細(xì)胞功能和血管生成的理想靶組織,。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法、專用培養(yǎng)基篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai ypsin (AT) ELISA Kit 大鼠抗(AT)試劑盒

HumanCollectinELISAKit 人膠原凝集素(Collectin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNA試劑盒人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5次

Humanα-Amylase,，AMS/AMYELISAKit人α(AMS/AMY)試劑盒規(guī)格：96T/48T

白介素-23抗體

類固醇脫氫酶樣蛋白1抗體

PLAU重組人 Urokinase / PLAU 蛋白 Protein

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員2(WNT2)重組蛋白 Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2)

IFNA2重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白 Protein

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員2(WNT2)重組蛋白 Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2)

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

PLAU重組人 Urokinase / PLAU 蛋白 Protein

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

IFNA2重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白 Protein

大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)試劑盒 ,，英文名： IL-1β ELISA Kit

Mouse macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒

Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanOncogeneProteinp190/bcr-ablELISAKit人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl

同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒20次

sPECAM-1大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1

收到細(xì)胞如何處理？

1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作